ELISA是酶聯(lián)免疫吸附試驗的簡稱,屬于臨床常用的免疫學檢測技術。該方法通過抗原抗體特異性結合反應與酶催化顯色原理,實現(xiàn)對體液樣本中微量物質(zhì)的定量或定性檢測。
ELISA檢測的核心原理包含三個關鍵步驟:固相包被、免疫反應和酶促顯色。首先將已知抗原或抗體固定在微孔板表面,加入待測樣本后,目標分子與固相包被物特異性結合;隨后加入酶標記的二抗,形成復合物;最終通過底物顯色反應,利用酶標儀測定吸光度值,推算待測物濃度。
根據(jù)檢測設計差異,ELISA主要分為四種類型:直接法、間接法、夾心法和競爭法。夾心法適用于大分子蛋白檢測,如腫瘤標志物CEA、AFP;競爭法則常用于小分子物質(zhì)測定,如激素、藥物濃度監(jiān)測。
該技術具有靈敏度高檢測下限可達pg/ml、批量檢測效率高、操作標準化等優(yōu)勢,廣泛應用于感染性疾病診斷如乙肝五項、HIV抗體篩查、自身免疫病檢測類風濕因子、抗核抗體、過敏原篩查及生物標志物監(jiān)測等領域。檢測結果需結合臨床表現(xiàn)綜合判斷,部分項目可能存在假陽性或假陰性情況。